WO2004039149A1 - ギラン・バレー症候群及び/又はフィッシャー症候群発症モデル非ヒト動物 - Google Patents

ギラン・バレー症候群及び/又はフィッシャー症候群発症モデル非ヒト動物 Download PDF

Info

Publication number
WO2004039149A1
WO2004039149A1 PCT/JP2003/013958 JP0313958W WO2004039149A1 WO 2004039149 A1 WO2004039149 A1 WO 2004039149A1 JP 0313958 W JP0313958 W JP 0313958W WO 2004039149 A1 WO2004039149 A1 WO 2004039149A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
guillain
syndrome
human animal
barre
barre syndrome
Prior art date
Application number
PCT/JP2003/013958
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
Toshiyuki Takai
Akira Nakamura
Syoko Sugawara
Kaori Yajima
Original Assignee
Japan Science And Technology Agency
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Japan Science And Technology Agency filed Critical Japan Science And Technology Agency
Priority to EP03770050A priority Critical patent/EP1563729A4/en
Priority to US10/533,700 priority patent/US7309810B2/en
Publication of WO2004039149A1 publication Critical patent/WO2004039149A1/ja

Links

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/85Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
    • C12N15/8509Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells for producing genetically modified animals, e.g. transgenic
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A01AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01KANIMAL HUSBANDRY; CARE OF BIRDS, FISHES, INSECTS; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
    • A01K67/00Rearing or breeding animals, not otherwise provided for; New breeds of animals
    • A01K67/027New breeds of vertebrates
    • A01K67/0275Genetically modified vertebrates, e.g. transgenic
    • A01K67/0276Knockout animals
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A01AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01KANIMAL HUSBANDRY; CARE OF BIRDS, FISHES, INSECTS; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
    • A01K2217/00Genetically modified animals
    • A01K2217/07Animals genetically altered by homologous recombination
    • A01K2217/075Animals genetically altered by homologous recombination inducing loss of function, i.e. knock out
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A01AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01KANIMAL HUSBANDRY; CARE OF BIRDS, FISHES, INSECTS; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
    • A01K2227/00Animals characterised by species
    • A01K2227/10Mammal
    • A01K2227/105Murine
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A01AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01KANIMAL HUSBANDRY; CARE OF BIRDS, FISHES, INSECTS; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
    • A01K2267/00Animals characterised by purpose
    • A01K2267/03Animal model, e.g. for test or diseases
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A01AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01KANIMAL HUSBANDRY; CARE OF BIRDS, FISHES, INSECTS; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
    • A01K2267/00Animals characterised by purpose
    • A01K2267/03Animal model, e.g. for test or diseases
    • A01K2267/0306Animal model for genetic diseases
    • A01K2267/0318Animal model for neurodegenerative disease, e.g. non- Alzheimer's
    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2500/00Screening for compounds of potential therapeutic value
    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2800/00Detection or diagnosis of diseases
    • G01N2800/28Neurological disorders

Definitions

  • the present invention relates to a model non-human animal exhibiting Guillain-Barre syndrome (Fisher syndrome).
  • Guillain-Nole syndrome which can be obtained by immunizing a ganglioside GQ1b to a non-human animal lacking the function of the FcaRIIB gene on the chromosome (nonhuman animal lacking the FcaRIIB gene).
  • the present invention relates to an onset model non-human animal, and a method for screening for a therapeutic agent for Guillain-Barre syndrome using the model non-human animal.
  • GRS Guillain-Barre syndrome
  • the Guillain-Barré syndrome develops 1 to 2 weeks after the appearance of cold-like symptoms and rapidly progresses to flaccid motor paralysis (limb weakness in the extremities) It is an inflammatory demyelinating disease in the peripheral nerve characterized by deep tendon reflex loss, dysphagia, dysarthria, deep sensory disorders, and autonomic nervous symptoms (arrhythmia, fluctuations in blood pressure).
  • the Guillain-Barré syndrome develops in two out of 100,000 people annually, and it is said that about 2000 to 250 new cases are affected every year in Japan.
  • Gandarioside is classified into GM1, GM2, GD1a, GDIb, GTla, GQlb, etc. based on its molecular structure.
  • autoantibodies corresponding to each are detected in patient sera.
  • anti-GM1 antibody and anti-GD1a antibody appear as anti-gandarioside antibodies in serum.
  • anti-GQ1b antibodies are specifically elevated in almost all cases of serum in acute phase of Guillain-Barre syndrome with ophthalmoplegia and Fisher syndrome.
  • Guillain-Barre syndrome is associated with Campylobacter jejuni, one of the causative bacteria of food poisoning.
  • Fisher syndrome is known as a subtype of Guillain-Barré syndrome. It is said that Fisher's syndrome accounts for about 5% of Guillain-Barre syndrome, It develops as a line infection, causing extraocular muscle paralysis, diplopia, ataxia, loss of tendon reflexes, and facial paralysis. It has the same symptoms as Guillain-Barre syndrome, but does not cause limb paralysis in humans.
  • Fischer syndrome group an increase in blood IgG antibody titer against gandarioside GQ1b has been reported.However, as in the above-mentioned Guillain-Barre syndrome, the mechanism of its onset has not been elucidated. However, no therapeutic drug has been developed.
  • FcR receptor that recognizes and binds the Fc portion of Ig
  • FcrR body fluids
  • Fc receptor Fc receptor
  • a receptor protein that specifically binds to the r-chain is based on similarity in gene structure, and is based on type I (CD64 antigen) and type II (CD32 antigen). ), Type III (CD16 antigen).
  • F cr RII unlike other F c Rs, has low affinity for monomeric IgG and binds to multivalent IgG that has become an immune complex, resulting in monocytes, macrophages, It is widely expressed on hematopoietic stem cells, including polymorphonuclear leukocytes (PMN;), mast cells, platelets, some T cell lymphocytes, and some B cell lymphocytes.
  • Fc7RII has three types of receptors, FcaRIIA, FcrRIIB, and FcrRIIC, which have different gene sequences, and all chromosomes are located on 1Q23. It has been known.
  • the above-mentioned FcRIIB is an amino acid sequence that transmits an inhibitory signal to an intracellular region without associating with an A chain (ITM: Immunoreceptor Tyrosine-based Inhibition Motif) (Immunol. Rev. 125, 49-76, 1992, Science 256, 1808-1812, 1992).
  • ITM Immunoreceptor Tyrosine-based Inhibition Motif
  • the present inventors have already produced FcaRIIB-deficient mice (Nature 379, 346-349, 1996), and A model mouse with arthritis induced by immunization with collagen II (J. Exp. Med. 189, 187-194, 1999) and an autoimmune disease model animal were prepared (Japanese Patent Application Laid-Open No. 08-2896999). Publication).
  • An object of the present invention is to provide a model non-human animal exhibiting Guillain-Barre syndrome (Fisher syndrome). More specifically, a non-human animal with Guillain-Palay syndrome onset that can be obtained by immunizing a non-human animal deficient in FcaRIIB gene with gandarioside GQlb, Guillain-Barre syndrome using the model non-human animal
  • An object of the present invention is to provide a method for screening a therapeutic drug.
  • the present inventors have conducted intensive studies to solve the above problems, and as a result, using FcrRIIB gene-deficient mice, gandarioside GM1, GM2, GDIa and GQ1b were subjected to Freund We immunized with an adjuvant and attempted to produce a Guillain-Barre-1 syndrome model mouse.
  • gandarioside antigens peripheral neuropathy in which FqRIIB gene-deficient mice immunized with GQlb had paralyzed tail and hind limbs was observed.
  • the present invention provides a Guillain-Barre, which is obtained by immunizing a non-human animal in which the function of the FcaRIIB gene is defective on the chromosome with gandriside GQ1b, and presents Guillain-Barre syndrome.
  • Syndrome onset model non-human animal (Claim 1)
  • the non-human animal with Guillain-Barre syndrome onset according to claim 1 or 2, wherein the non-human animal lacking FcaRIIB gene is a rodent.
  • the non-human animal model for developing Guillain-Palais syndrome according to any one of claims 1 to 3, characterized in that the animal is a mouse (claim 4), and the rodent is a mouse.
  • the present invention relates to a non-human animal model for developing Guillain and Barre's syndrome according to claim 5 (claim 5).
  • the present invention also provides a method for administering a test substance to a Guillain-Barre syndrome model non-human animal according to any one of claims 1 to 5, and observing the degree of Guillain-Barre syndrome in the model non-human animal.
  • the method of screening for a therapeutic agent for Guillain-Barre syndrome which is characterized by the evaluation (Claim 6), and the non-human animal with Guillain-Barre syndrome onset model according to any one of Claims 1 to 5,
  • a screening method for a therapeutic agent for Guillain-Barré syndrome and Z or Fisher syndrome which comprises administering a test substance and measuring and evaluating the appearance of anti-GQ1b antibody (Claim 7).
  • a therapeutic agent (claim 8) obtained by the method for screening a therapeutic agent for Guillain-Barre syndrome according to item 6 or 7.
  • FIG. 1 shows the paralysis of the tail and hind limbs of the non-human animal model of Guillain-Palais syndrome and / or Fisher syndrome group of the present invention (upper diagram; RIIB " / -) and the control channel. It is a photograph showing a wild type mouse (lower figure; WT).
  • FIG. 2 is a view showing a paralysis symptom score of a non-human animal model of Guillain-Barre syndrome and Z or Fisher syndrome group onset of the present invention and a wild-type mouse as a control.
  • FIG. 3 shows serum anti-GQ1b antibodies IgG1, IgG2a and Ig of wild-type mice as non-human animals and Guillain-Barre syndrome and Z or Fisher syndrome group onset model of the present invention and control.
  • FIG. 3 shows the antibody titer of G2b. BEST MODE FOR CARRYING OUT THE INVENTION
  • the Guillain-Barre syndrome syndrome model non-human animal of the present invention is obtained by immunizing a non-human animal whose Fc7RIIB gene function is chromosomally deficient with gandarioside GQ1b, There is no particular limitation as long as it is a non-human animal that exhibits
  • Guillain-Barré syndrome is a non-hereditary disease that is caused one to two weeks after the appearance of cold-like symptoms and rapidly progresses to flaccid motor paralysis (muscle weakness in the limbs). It is a disorder characterized by deep tendon loss, dysphagia, dysarthria, dysarthria, deep sensory disorders, and autonomic nervous symptoms (arrhythmia, fluctuations in blood pressure) and similar disorders.
  • the FcrRIIB gene-deficient non-human animal of the present invention may be any model animal in which the FcRIIB gene function is deficient on the chromosome, but may be any rodent such as a mouse or rat.
  • a mouse in which the function of the FcrRIIB gene is deficient on the chromosome can be preferably mentioned.
  • a mouse in which the function of the FcrRIIB gene is deficient on the chromosome can be mentioned in the above-mentioned literature ( Nature 379, 346-349, 1996).
  • the FcaRIIB gene is screened, and the screened FcaRIIB gene is used using a virus vector or the like. Subcloned and identified by DNA sequencing. By replacing the fragment containing the S 2 Ekison and E Ekison of this clone pMC l neo gene cassette or the like, to prepare a data one target vector.
  • This linearized vector is introduced into ES cells by electroporation (electroporation) or the like, and homologous recombination is performed. Among the homologous recombinants, resistance to G418 etc. is obtained.
  • the indicated ES cells are selected, and a clone of the cell is injected into the mouse blastocyst by a microphone, and the blastocyst is returned to the foster parent mouse to prepare a chimeric mouse.
  • a heterozygous mouse can be obtained by intercrossing this chimeric mouse with a wild-type mouse, and an FcRIIB knockout mouse can be obtained by crossing this heterozygous mouse in and out. be able to.
  • the method for producing a Guillain-Barre syndrome-onset model non-human animal includes obtaining a Guillain-Barre syndrome-onset model non-human animal. Any method can be used as long as it can be performed, and is not particularly limited.
  • a preferred example is a method of immunizing the above-mentioned non-human animal deficient in Fc ⁇ RIIB gene with gandarioside GQ1b as an antigen. be able to.
  • the method of immunization is not particularly limited, but is a method of immunizing with GQ1b antigen together with complete Freund's adjuvant at the time of first immunization, and immunizing with incomplete Freund's adjuvant every three weeks thereafter. Can be suitably exemplified.
  • the gandarioside GQ1b used in the present invention is a glycosphingolipid produced from lactosylceramide (C er) in the b pathway synthesis system, and has four sialic acids (S ia); 3 1 ⁇ 3 (3-2 a S ia 3 2a S ia) G al NA c i3 1 ⁇ 4 G al j3 1 ⁇ 4 (3-2 cu S ia 3 ⁇ 2 a S ia) G 1 c; 8 Glycosphingolipid having a structure of 1 ⁇ 1'Cer.
  • the characteristics of the GQlb are characterized by the binding form of 3-2 Sia, which is a unique sugar chain.
  • specific antibodies have been obtained for each ganglioside. Since the antibodies recognizing each gandarioside recognize the difference in the binding form of the above-mentioned sugar chain 3-2 Sia, the anti-GQlb (monoclonal) antibody also binds the four 3-2 Sia. It is thought that the form was recognized specifically.
  • a screen capable of confirming the pharmacological effect of the therapeutic agent and selecting by using the non-human animal model of Guillain-Palais syndrome development of the present invention.
  • the method is not particularly limited, as long as it is a method for administering the test substance to a Guillain-Barré syndrome-onset model non-human animal of the present invention orally or parenterally, and the disease state is scored to obtain a time course.
  • the degree of symptom degree of reduction
  • the method include administering a test substance, and measuring and evaluating the degree of appearance of the anti-GQ1b antibody appearing in the blood of the model non-human animal.
  • ELISA analysis using a secondary antibody can be specifically exemplified.
  • the therapeutic agent for Guillain-Barre syndrome syndrome obtained by the above-mentioned screening method of the present invention can be used for treatment of a patient who has developed Guillain-Barre syndrome (Fisher syndrome).
  • the therapeutic agent for Guillain-Barre syndrome according to the present invention can be administered orally or parenterally.
  • Oral preparations can be solid preparations such as powders, granules, capsules and tablets or liquid preparations such as syrups and elixirs.
  • parenteral preparations can be prepared as injections, transdermal preparations, suppositories and the like. These preparations can be manufactured according to a conventional method by adding a pharmacologically and pharmaceutically acceptable auxiliary to the active ingredient.
  • the dose can be appropriately determined according to the type of the target disease, the age, sex, weight, symptoms, and administration form of the patient.
  • the present invention will be described more specifically with reference to examples, but the technical scope of the present invention is not limited to these examples.
  • Reference example (FRIRIIB-deficient mouse production)
  • a genomic DNA clone of the FcaRIIB gene was isolated by screening the genomic DNA library of the 129 / Sv / J (H-2b) mouse.
  • Target vector a fragment of 2. 6 5 K b comprising two independent Ekison of S 2 ⁇ beauty EC ⁇ of this clone pMC in 1 neo gene cassette (Toyobo Co., Ltd.), cowpea to replacing Produced.
  • This linearized vector was introduced into ES cells (J1) by electroporation, and homologous recombination was performed.
  • ES clones Isolate ES clones from ES cells that have undergone homologous recombination as described above, screen neomycin-resistant ES clones against G418 and GANC (gancyclovir), and identify homologous recombinants by Southern blotting did.
  • the genomic DNA was isolated from the identified homologous recombinant and digested with Hindill to confirm that it contained a targeted allele containing the pMCl neogene cassette.
  • Such confirmed ES clones are microinjected into blastocysts to produce chimeric mice, and the resulting mice are heterozygous by intercrossing with wild-type C57B LZ6 (H-2b) mice.
  • mice In order to obtain zygotic mice and to obtain homozygous mice, the heterozygous mice were crossed one after another to obtain a mouse in which the function of the FCTR IIB gene was deficient on the chromosome and its wild type. Type mice were prepared.
  • Example 1 Immunization of FcaRIIB gene-deficient mice
  • GM1, GM2, GDla, GDlb and GQ1b (all manufactured by ALEXIS) were used as gandariosides.
  • CFA complete Freund's adjuvant
  • Two types of emulsions were prepared by mixing 1 g 1 of a gandarioside solution containing 1 mg Zm 1 of each gandarioside and 3 mg Zml of incomplete Freund's adjuvant (IFA) consisting of liquid paraffin and a surfactant in a connected syringe.
  • IFA incomplete Freund's adjuvant
  • GQ1b-immunized wild-type mice and FcrRIIB gene-deficient mice were scored according to their symptoms. 0 points: no symptoms, 1 point: paralysis of the tail, 2 points: tail and bilateral hind limbs Paralysis, 3 points: tail and limb paralysis, 4 points: death.
  • the results are shown in FIG. In FIG. 2, the scores of wild-type mice are represented by black squares (garden), and the scores of FcrR R gene-deficient mice are represented by white squares (mouth).
  • mice immunized with FQRIIB gene-deficient mice immunized with GQ1b developed Guillain-Barre-1 syndrome (Fitzshire syndrome) (FIG. 2).
  • Example 3 Serum antibody titer against GQ 1b
  • the FcaRIIB knockout mouse ( ⁇ —K ⁇ ) has a higher antibody titer (GgI, IgG2a, Ig) against GQlb than the wild-type mouse (WiId). G2b) elevation was observed, which is consistent with the findings of Guillain-Barré syndrome (Fisher's syndrome).
  • the non-human animal model of Guillain-Paraie syndrome and / or Fisher's syndrome of the present invention exhibits paralysis in the tail and hind limbs and has a high antibody titer against gandarioside. It can be regarded as developing symptoms that match the type of Fisher's syndrome, and can be used for the development of treatment methods and therapeutics for these symptoms.

Abstract

 FcγRIIB遺伝子欠損非ヒト動物にガングリオシドGQ1bを免疫することにより得ることのできるギラン・バレー症候群発症モデル非ヒト動物や、該モデル非ヒト動物を用いたギラン・バレー症候群治療薬のスクリーニング方法を提供するものである。FcγRIIB遺伝子欠損マウスを用い、ガングリオシドGM1、GM2、GD1a及びGQ1bを3週間毎に計4回フロイント・アジュバントとともに免疫し、ギラン・バレー症候群発症モデルマウスを作製する。

Description

明 細 書 ギラン ·バレ一症候群及び/又はフィッシヤー症候群発症モデル非ヒ卜 動物 技術分野
本発明は、 ギラン ·バレ一症候群 (フィ ッシャー症候群) を呈するモ デル非ヒト動物に関する。 特に、 F c ァ R I I B遺伝子の機能が染色体上 で欠損した非ヒト動物 (F c ァ R I I B遺伝子欠損非ヒト動物) にガング リオシド G Q 1 bを免疫することにより得ることのできるギラン · ノ レ 一症候群発症モデル非ヒト動物、 及び、 該モデル非ヒト動物を用いた、 ギラン · バレ一症候群治療薬のスクリーニング方法に関する。 背景技術
ギラン ·バレ一症候群 (Gu i l l a i n- Bar re syndrome; G B S ) は、 感冒 様症状を呈した後、 1〜 2週間後に発症し、 急速に進行する弛緩性の運 動麻痺 (四肢の筋力低下)、 深部腱反射消失、 嚥下障害、 構音傷害、 深部 感覚障害、 自律神経症状 (不整脈、 血圧の変動) を特徴とする、 末梢神 経における炎症性脱髄疾患である。 ギラン ·バレ一症候群は年間人口 1 0万人に対し 2人の割合で発症し、 日本全国で毎年約 2 0 0 0人〜 2 5 0 0人が新たに罹患しているといわれている。 しかし、 これを完治し得 る治療薬は未だ開発されていないばかりか、 発症原因やメカニズムも明 確には明らかにされておらず、 いわゆる難病の類に分類され、 特定疾患 に指定されている。 近年になって、 本症候群に対する治療法として、 血 漿交換療法 (プラズマフェレ一シス) ゃ抗ガンマグロブリン大量静注法 が有効であることが報告され、 また、 本症候群の病因として、 患者血清 中に末梢神経に発現しているガンダリオシドに対する自己抗体 (抗糖鎖 抗体) が検出され、 病勢と関連することから、 その発症機序にはガング リオシドと自己免疫反応が密接に関与していることが指摘されている。 ガンダリオシドはその分子構造から G M 1、 G M 2、 G D 1 a、 GD I b、 GT l a、 GQ l b等に分けられ、 該疾患において、 患者血清中に はそれぞれに対する自己抗体が検出されている。 特に、 該ギラン 'バレ 一症候群においては、 血清中に抗ガンダリオシド抗体として抗 GM 1抗 体及び抗 GD 1 a抗体が出現することが知られている。 また、 抗 GQ 1 b抗体は、 眼筋麻痺を伴うギラン ·バレ一症候群の急性期血清中や、 フ ィッシヤー症候群においてほぼ全例に特異的に上昇が認められている。 最近、 ギラン ·バレー症候群の原因として食中毒の原因菌の一つであ るカンピロバクタ一 · ジェジュニ (Campylobacter jejuni) との関連が 指摘されている。 これは、 カンピロバクタ一の糖鎖構造とガンダリオシ ドとの間に分子相同性があり、 これが自己反応性の T細胞や B細胞の出 現につながると考えられている。 しかし、 現在まで自己抗体を含め、 自 己反応 ffiT細胞や B細胞が実際の生体の病態につながるかどうかは証明 されていない。 動物実験レベルでは、 ゥサギに GD 1 bを免疫し、 末梢 神経障害を誘導した報告があるが、 これまでマウスに各種ガンダリオシ ドを免疫しても病態を発症することはなく、 適切なギラン ·バレー症候 群の疾患モデルマウスは存在していなかった。 また、 上記のようにゥサ ギに該疾患を誘導したものや、 ラッ トに誘導したものは発症率が低く、 また症状も軽いため、 モデルとして不適切であった。 更に、 適切なモデ ル動物が存在しないため、 治療薬や治療方法は開発されなかった。
同様に、 ギラン ' バレー症候群の亜型として、 フィ ッシャー症候群 (Fisher syndrome) が知られている。 該フィッシヤー症候群はギラン · バレー症候群の約 5 %が該当するといわれており、 上気道感染などを先 行感染として発症するもので、 外眼筋麻痺、 複視、 運動失調、 腱反射消 失、 顔面神経麻痺を生ずる。 上記ギラン ·バレー症候群と同様の症状を 呈するが、 ヒトにおいて四肢の麻痺は生じない。 また、 フィッシャー症 候群については、 ガンダリオシド GQ 1 bに対する血中 I g G抗体価の 上昇が報告されているが、 上記ギラン ·バレー症候群と同様、 その発症 機序は解明されておらず、 また、 治療薬も開発されていない。
これらの病勢は罹病後 1ヶ月位をピークに、 数ケ月から 1年程で徐々 に回復し、 予後は比較的良好であるが、 後遺症を残すことも少なくない。 また、 1年近くもの間、 患者は精神的苦痛と入院 ·通院を余儀なくされ るため、 かかる疾患の治療薬、 治療方法の開発は患者とその家族、 医師 達をはじめとする医療界から熱望されている。
他方、 免疫系などの細胞の表面上には、 I gの F c部分を認識して結 合するレセプ夕一 (以下 「F c R」 という) が存在し、 その中でも体液 中の I gGの r鎖に特異的に結合する受容体蛋白質である F cァレセプ ター (以下 「F c r R」 という) は遺伝子構造の類似性に基づいてタイ プ I ( C D 64抗原)、 タイプ II ( C D 32抗原)、 タイプ III ( C D 1 6抗原) の 3種に大きく分類されている。 これらのうち、 F c r RIIは, 他の F c Rとは異なりモノマーの I g Gに対して低親和性であり、 免疫 複合体となった多価 I gGと結合し、 単球、 マクロファージ、 多形核白 血球 (PMN;)、 マスト細胞、 血小板、 いくつかの T細胞リンパ球及びい くつかの B細胞リンパ球を含む造血幹細胞に広く発現する。 また、 F c 7 RII には遺伝子配列が異なる F cァ RIIA、 F c r RIIB及び F c r R IICの 3種類の受容体が存在しており、 いずれの染色体も 1 Q 23に 位置していることが知られている。
上記 F cァ RIIBは、 他の F c Rとは異なり、 ァ鎖と会合することな く、 細胞内領域に抑制性シグナルを伝達するアミノ酸配列 ( I T I M : Immunoreceptor Tyrosine-based Inhibition Motif) を有している (Immunol. Rev. 125, 49-76, 1992、 Science 256, 1808-1812, 1992)。 このような F cァ RIIBの生理的機能を解明するために、 本発明者らは F cァ RIIB欠損マウスを既に作出し (Nature 379, 346-349, 1996)、 F c r RIIB欠損マウスをタイプ IIコラーゲンで免疫することによる関 節炎モデルマウス (J. Exp. Med. 189, 187-194, 1999) や、 自己免疫疾 患モデル動物を作製した (特開平 0 8— 2 8 9 6 9 9号公報)。
これまで炎症性脱髄疾患であるギラン ·バレー症候群の発症メカニズ ムを検討する際に適切なモデル動物がいなかった。 本発明の課題は、 ギ ラン ·バレー症候群 (フィッシャー症候群) を呈するモデル非ヒト動物 を提供することにある。 より詳しくは、 F cァ RIIB遺伝子欠損非ヒト 動物にガンダリオシド GQ l bを免疫することにより得ることのできる ギラン ·パレー症候群発症モデル非ヒト動物や、 該モデル非ヒト動物を 用いたギラン ·バレ一症候群治療薬のスクリーニング方法を提供するこ とにある。
本発明者らは、 上記課題を解決すべく鋭意研究の結果、 F c r RIIB 遺伝子欠損マウスを用い、 ガンダリオシド GM 1、 GM2、 GD I a及 び GQ 1 bを 3週間毎に計 4回フロイント · アジュバントとともに免疫 し、 ギラン ·バレ一症候群モデルマウスの作製を試みた。 その結果、 こ れらガンダリオシド抗原を免疫したもののうち、 GQ l bを免疫した F c r RIIB遺伝子欠損マウスにおいて尾及び後肢が麻痺する末梢神経障 害を認めた。 このマウスでは GQ 1 bに対する抗体価が上昇することか ら、 通常、 ヒトで認められる GQ 1 bに対する自己抗体が認められるギ ラ ン · バレー症候群の亜型であるフィ ッ シャー症候群 ( Fisher syndoroie) に矛盾しない症状と考えられ、 ギラン 'バレー症候群 (フィ ッシヤー症候群) の新規疾患モデルマウスが得られることを見い出し、 本発明を完成するに至った。 また、 本発明に基づき、 該症候群に対する 有効な治療薬のスクリ一二ング方法を構築した。 発明の開示
すなわち本発明は、 F c ァ R I I B遺伝子の機能が染色体上で欠損した 非ヒト動物をガンダリオシド G Q 1 bで免疫することにより得られ、 ギ ラン ·バレー症候群を呈することを特徴とするギラン ·バレ一症候群発 症モデル非ヒト動物 (請求項 1 ) や、 ギラン ·バレー症候群がフイツシ ヤー症候群であることを特徴とするギラン ·バレー症候群発症モデル非 ヒト動物 (請求項 2 ) や、 尾及び後肢が麻痺する末梢神経傷害であるこ とを特徴とする請求項 1又は 2記載のギラン ·バレ一症候群発症モデル 非ヒト動物 (請求項 3 ) や、 F c ァ R I I B遺伝子欠損非ヒト動物が、 げ つ歯類動物であることを特徵とする請求項 1〜 3のいずれか記載のギラ ン ·パレー症候群発症モデル非ヒト動物 (請求項 4 ) や、 げっ歯類動物 が、 マウスであることを特徴とする請求項 5記載のギラン ,バレ一症候 群発症モデル非ヒト動物 (請求項 5 ) に関する。
また本発明は、 請求項 1〜 5のいずれか記載のギラン ·バレー症候群 発症モデル非ヒト動物に、 被検物質を投与し、 該発症モデル非ヒト動物 におけるギラン ·バレー症候群の症状の程度を観察 ·評価することを特 徴とするギラン ·バレ一症候群の治療薬のスクリーニング方法 (請求項 6 ) や、 請求項 1〜 5のいずれか記載のギラン 'バレー症候群発症モデ ル非ヒト動物に、 被検物質を投与し、 抗 G Q 1 b抗体の出現の程度を測 定 ·評価することを特徴とするギラン ·バレ一症候群及び Z又はフィッ シヤー症候群治療薬のスクリーニング方法 (請求項 7 ) や、 請求項 6又 は 7記載のギラン ·バレー症候群治療薬のスクリーニング方法によって 得られる治療薬 (請求項 8 ) に関する。 図面の簡単な説明
第 1図は、 本発明のギラン · パレ一症候群及び/又はフィッシヤー症候 群発症モデル非ヒト動物の尾及び後肢が麻痺している様子 (上図 ; R I I B " / - ) 及びコント口一ルとしての野生型マウス (下図 ; W T ) を表 す写真である。
第 2図は、 本発明のギラン · バレー症候群及び Z又はフィッシヤー症候 群発症モデル非ヒト動物及びコントロールとしての野生型マウスの麻痺 症状スコア一を示す図である。
第 3図は、 本発明のギラン ·バレー症候群及び Z又はフィッシャー症候 群発症モデル非ヒト動物及びコントロールとしての野生型マウスの血清 抗 G Q 1 b抗体 I g G 1、 I g G 2 a及び I g G 2 bの抗体価を示す図 である。 発明を実施するための最良の形態
本発明のギラン ·バレー症候群発症モデル非ヒト動物としては、 F c 7 R I I B遺伝子の機能が染色体上で欠損した非ヒト動物をガンダリオシ ド G Q 1 bで免疫することにより得られ、 ギラン ·バレ一症候群を呈す る非ヒト動物であれば特に制限されるものではない。 ここでギラン 'バ レー症候群とは、 非遺伝性の疾患であって、 感冒様症状を呈した後、 1 〜 2週間後に引き起こされ、 急速に進行する弛緩性の運動麻痺 (四肢の 筋力低下)、 深部腱反射消失、 嚥下障害、 構音傷害、 深部感覚障害、 自律 神経症状 (不整脈、 血圧の変動) を特徴とする疾患やそれらに類似した 疾患である。 かかるギラン ·バレ一症候群を発症した場合、 ガンダリオ シド G Q 1 bに対する血清中の抗体価が上昇し、 より具体的には、 外眼 筋麻痺、 複視、 運動失調、 腱反射消失、 顔面神経麻痺、 尾や後肢等の末 梢神経障害等を生じる。 また、 上記ギラン · バレ一症候群と同様の症状 を呈するが、 ヒトにおいて四肢の麻痺を生じないフィッシヤー症候群も ギラン ·バレ一症候群の一つである。
本発明の F c r RIIB遺伝子欠損非ヒト動物としては、 F cァ RIIB 遺伝子機能が染色体上で欠損したモデル動物であればどのようなもので もよいが、 マウスやラット等のげつ歯類、 特に、 該 F c rRIIB遺伝子 の機能が染色体上で欠損したマウスを好適に挙げることができ、 該 F c r RIIB遺伝子の機能が染色体上で欠損したマウスは、 本発明者らの前 掲の文献 (Nature 379, 346-349, 1996) に記載する方法等によって作製 することができる。 具体的には、 マウス遺伝子ライブラリ一から P C R 等の方法により得られた遺伝子断片を用い、 F cァ RIIB遺伝子をスク リ一ニングし、 スクリーニングされた F cァ RIIB遺伝子を、 ウィルス ベクター等を用いてサブクローンし、 DN Aシ一ゲンシングすることに より特定する。 このクローンの S 2ェキソン及び E ェキソンを含むフ ラグメントを pMC lネオ遺伝子カセッ ト等に置換することによって、 タ一ゲットベクターを調製する。 この線状化されたベクターをエレクト 口ポレーシヨン (電気穿孔) 法等によって E S細胞に導入し、 相同的組 換えを行い、 その相同的組換え体の中から、 G 4 1 8等に抵抗性を示す E S細胞を選択し、 その細胞のクローンをマウスの胚盤胞中にマイク口 インジェクションし、 かかる胚盤胞を仮親のマウスに戻し、 キメラマウ スを作製する。 このキメラマウスを野生型のマウスとインタークロスさ せると、 ヘテロ接合体マウスを得ることができ、 また、 このへテロ接合 体マウスをイン夕一クロスさせることによって、 F cァ RIIBノックァ ゥトマウスを得ることができる。
本発明におけるギラン ·バレー症候群発症モデル非ヒト動物の作製方 法としては、 ギラン,バレー症候群発症モデル非ヒト動物を得ることの できる方法であればどのような方法でも良く、 特に限定されるものでは ないが、 前記の F c γ RIIB遺伝子欠損非ヒト動物に、 抗原としてガン ダリオシド GQ 1 bを免疫する方法を好適に例示することができる。 ま た、 免疫する方法としては、 特に限定されるものではないが、 初回免疫 時に GQ 1 b抗原をコンプリート · フロイント · アジュバントとともに 免疫し、 以後 3週間毎にインコンプリート · フロイント · アジュバント とともに免疫する方法を好適に例示することができる。 また、 合計 3〜 6回免疫するのが望ましいが、 特に合計 4回免疫するのが好ましい。 本発明において用いられるガンダリオシド GQ 1 bは、 ラク トシルセ ラミ ド (C e r ) から b経路合成系で産生されるスフィンゴ糖脂質であ つて、 シアル酸 (S i a) を 4つ有し、 G a l ]3 1→ 3 ( 3— 2 a S i a 3 2 a S i a) G a l NA c i3 1→4 G a l j3 1→4 ( 3— 2 cu S i a 3 ^ 2 a S i a) G 1 c ;8 1→ 1 ' C e rの構造を有するスフイン ゴ糖脂質をいう。 これらのうち、 該 GQ l bの特性は、 特有の糖鎖であ る 3— 2 ひ S i aの結合形式によって特徴づけられている。 また、 各ガ ングリオシドには特異的な抗体が得られている。 各ガンダリオシドを認 識する抗体は、 上記の糖鎖 3— 2 S i aの結合形式の相違を認識して いることから、 該抗 GQ l b (モノクローナル) 抗体も、 4つの 3— 2 S i aの結合形式を特異的に認識していると考えられる。
本発明のギラン'バレー症候群治療薬のスクリ一ニング方法としては、 本発明のギラン ·パレー症候群発症モデル非ヒト動物を用い、 該治療薬 の薬理的効果を確認し、 選別することのできるスクリ—ニング方法であ れば特に限定されるものではないが、 例えば、 本発明のギラン 'バレー 症候群発症モデル非ヒト動物に被検物質を経口的又は非経口的に投与し 病状をスコア一化して経時的に症状の程度 (軽減の度合い) を観察 '評 価する方法や、 本発明のギラン · バレー症候群発症モデル非ヒト動物に 被検物質を投与し、 該モデル非ヒト動物の血中に出現している抗 GQ 1 b抗体の出現程度を測定'評価する方法を具体的に挙げることができる。 上記血中に出現している抗 GQ 1 b抗体の出現程度を測定する方法とし ては、 2次抗体を用いた E L I S A分析を具体的に例示することができ る。
本発明の上記スクリーニング方法により得られるギラン ·バレ一症候 群治療薬は、 ギラン ·バレー症候群 (フィッシャー症候群) を発症した 患者の治療に用いることができる。 本発明のギラン ·バレ一症候群治療 薬は、 経口的あるいは非経口的に投与することができる。 経口投与剤と しては散剤、 顆粒剤、 カプセル剤、 錠剤などの固形製剤あるいはシロッ プ剤、 エリキシル剤などの液状製剤とすることができる。 また、 非経口 投与剤として注射剤、 経皮製剤あるいは座薬等とすることができる。 こ れらの製剤は活性成分に薬理学的、 製剤学的に認容される助剤を加える ことにより常法に従って製造することができる。 また、 投与量は、 対象 疾患の種類、 患者の年齢、 性別、 体重、 症状、 投与形態に応じて適宜決 定することができる。 以下、 実施例により本発明をより具体的に説明するが、 本発明の技術 的範囲はこれらの例示に限定されるものではない。 参考例 (F c ァ RIIB欠損マウスの作製)
1 2 9/S v/ J (H- 2 b) マウスのゲノム DNAライプラリーを スクリーニングすることによって、 F c ァ R II B遺伝子のゲノム DNA のクローンを単離した。 ターゲッ トベクターは、 このクローンの S 2及 び E C丄の 2つの独立したェキソンを含む 2. 6 5 K bのフラグメント を pMC 1ネオ遺伝子カセッ ト (東洋紡社製) に、 置換することによつ て作製した。 この線状化したベクターをエレク トロポレーシヨンによつ て E S細胞 ( J 1 ) に導入し、 相同的組換えを行った。
上記の相同的組換えを起こした E S細胞から E Sクローンを単離し、 G 4 1 8及びGANC (ガンシクロビア) に対してネオマイシン耐性 E Sクローンをスクリーニングし、 サザンプロッ ト法によって相同的組換 え体を同定した。 その同定された相同的組換え体からゲノム DN Aを単 離して、 H i n dill でダイジェストし、 p M C 1ネオ遺伝子カセッ ト を含むタ一ゲティングされた対立遺伝子を含んでいることを確認した。 かかる確認された E Sクローンを胚盤胞中にマイクロインジェクション し、 キメラマウスを作製し、 作製されたマウスを野生型の C 5 7 B LZ 6 (H— 2 b) マウスとインタークロスさせることによってヘテロ接合 体マウスを得て、 また、 ホモ接合体マウスを得るために、 このへテロ接 合体マウスをィン夕一クロスさせて、 F C T R II B遺伝子の機能が染色 体上で欠損したマウス及びその野生型マウスを作製した。 実施例 1 (F c ァ RIIB遺伝子欠損マウスへの免疫)
ガンダリオシドとして、 GM 1、 GM 2、 GD l a、 GD l b及び G Q 1 b (いずれも AL EX I S社製) を用いた。 各ガンダリオシド l m gZm 1 を含むガンダリオシド溶液 1 m 1 と、 流動パラフィン、 界面活 性剤及び結核死菌からなる完全フロイントアジュバンド (C FA) 3m g /m 1 とを連結シリンジ中で混合し、 また各ガンダリオシド 1 m g Z m 1 を含むガンダリオシド溶液 1 m 1 と、 流動パラフィンと界面活性剤 とからなる不完全フロイント ' アジュバント ( I FA) 3mgZm l と を連結シリンジ中で混合して、 2種類のェマルジョンを作製した。
上記参考例記載の方法により作製した F c r RIIB遺伝子欠損マウス (8週齢:雌雄差なし) (n = 5 ) をエーテルで麻酔し尾背部を剃毛し、
0 各ガンダリオシドと C FAとをそれぞれ 5 O gと 1 0 0 i gとを含む ェマルジヨン 1 5 0 1 をマウスの皮内に注射して一次免疫を行い、 そ の一次免疫後、 3週間毎に 3回、 各ガンダリオシドと I FAとをそれぞ れ 5 と 1 0 とを含むェマルジヨン 1 5 0 1 を皮内に注射 し、 ギラン ·バレ一症候群発症マウスの作製を試みた。 また、 対照とし ては野生型マウス (n= 5) を用いた。 その結果、 GQ l bを免疫した F c r R II B遺伝子欠損マウスにおいて、 後肢と尾部に麻痺が生じる末 梢神経障害を認めた。 このマウスは後肢が開き、 歩行することができず、 また尾は垂れ下がつていた (第 1図 ; R I I B_/ )。 一方、 GM 1、 G M 2、 GD l a、 G D 1 bを免疫した F c τ R Π B遺伝子欠損マウスや コントロールである野生型マウス (第 1図 ; WT) においては、 麻痺症 状などが認められなかった。 実施例 2 (麻痺症状スコア一)
GQ 1 b免疫を行った野生型マウス及び F c r R II B遺伝子欠損マウ スについて、 その症状によって点数化し、 0点: 無症状、 1点 : 尾の麻 痺、 2点: 尾及び両側後肢の麻痺、 3点: 尾及び四肢麻痺、 4点 :死亡 の 5段階に分けて評価した。 結果を第 2図に示す。 なお、 第 2図中、 野 生型マウスの点数は黒の四角 (園) で表し、 F c r R ΠΒ遺伝子欠損マ ウスの点数は白の四角 (口) で表した。 その結果、 F c r RIIB遺伝子 欠損マウスに GQ 1 b免疫を行ったマウスは、ギラン ·バレ一症候群(フ イツシヤー症候群) の発症を認めた (第 2図)。 実施例 3 (GQ 1 bに対する血清抗体価)
また、 一次免疫後、 3週、 6週、 9週及び 1 2週後に採血を行い、 G Q 1 b免疫を行った野生型マウス及び F c r R II B遺伝子欠損マウスの 眼窩より採血を行ない、 文献 (Cell. Immunol.145, 299-310, 1992) 記 載の E L I S A分析に改良を加えた次の方法により、 GQ 1 bに対する 抗体価を検査した。 5 OmM炭酸水素ナトリウム溶液 (pH= 8. 5 ) lm lに 5 ^ gの GQ l bを溶解させ、 この溶解液を 1ゥエル当たり 5 0 1の割合で用い、 正に帯電した 96ウェルマイク口プレート (NU NC社製) を 4 °Cにて一晚コ一ティングした後、 0. 0 5 %の Twe e n 20と 0. 1 %の B S Aを含む P B Sで 1回洗浄し、 1ゥェル当たり 2 5 0 1の 0. 5 %の B S Aを含む P B Sで 4°Cにて一晚ブロックし た。 次に上記血液から得られた血清を 50 0に希釈し、 その希釈した血 清を 1ゥエル当たり 50 1の割合で上記 96ウェルマィクロプレート に加え、 4 °Cにて一晩反応させた。 反応後、 96ウェルマイク口プレー トを 0. 0 5 %の Twe e n 20を含む P B Sで 3回洗浄し、 ペルォキ シダーゼ (シグマ社製) が結合したャギ抗マウス I g G 1、 I g G 2 a 又は I gG 2 bを 500倍に希釈したものを 50 l加えて、 4 にて 2時間インキュベートした。 インキュベート後、 再び 0. 0 5 %の Tw e e n 2 0 を含む P B Sで 3 回洗浄し、 5 0 1 の TureBlue Peroxidase Substrate & Perry Labs社 ) と共に 30分 間室温で酵素反応を行った。その後、ミクロプレートリーダ一(Biohimin 960; Molecular Dynamics社製) で OD 450を測定した。 結果を第 3 図に示す。 なお、 第 3図中、 野生型マウスの吸光度は黒の四角 (画) で 表し、 F cァ RIIB遺伝子欠損マウスの吸光度は白の四角 (口) で表し た。 これらの結果から、 F cァ RIIBノックアウトマウス (ΠΒ— K〇) は、 野生型マウス (W i I d) に比べて、 GQ l bに対する抗体価 ( I gG l、 I g G 2 a、 I g G 2 b ) の上昇が認められ、 ギラン ' バレ一 症候群 (フィ ッシャー症候群) の所見と矛盾していないことから、 ギラ ン 'バレー症候群 (フィッシャー症候群) 発症モデルマウスが作製でき
2 たことがわかった。 産業上の利用可能性
本発明のギラン ·パレー症候群及び 又はフィッシヤー症候群発症モ デル非ヒト動物は、 尾及び後肢に麻痺症状を呈し、 ガンダリオシドに対 する抗体価が高いことから、 ヒトにおけるギラン 'バレー症候群及び該 症候群の亜型であるフィッシャ一症候群に合致する症状を発症している とみなすことができ、 これら症状の治療方法や治療薬の開発に用いるこ とができる。

Claims

請 求 の 範 囲
1 . F c r R I I B遺伝子の機能が染色体上で欠損した非ヒト動物をガン ダリオシド G Q 1 bで免疫することにより得られ、 ギラン ·バレー症候 群を呈することを特徴とするギラン ·バレー症候群発症モデル非ヒ卜動 物。
2 . ギラン ·バレ一症候群がフィッシヤー症候群であることを特徴とす るギラン ·バレ一症候群発症モデル非ヒト動物。
3 . 尾及び後肢が麻痺する末梢神経傷害であることを特徴とする請求項 1又は 2記載のギラン ·バレー症候群発症モデル非ヒト動物。
4 . F c ァ R I I B遺伝子欠損非ヒト動物が、 げっ歯類動物であることを 特徴とする請求項 1〜 3のいずれか記載のギラン ·バレ一症候群発症モ デル非ヒト動物。
5 . げっ歯類動物が、 マウスであることを特徴とする請求項 5記載のギ ラン ·バレー症候群発症モデル非ヒト動物。
6 . 請求項 1〜 5のいずれか記載のギラン ·バレ一症候群発症モデル非 ヒ卜動物に、 被検物質を投与し、 該発症モデル非ヒ卜動物におけるギラ ン ·バレ一症候群の症状の程度を観察 ·評価することを特徴とするギラ ン ·バレ一症候群の治療薬のスクリーニング方法。
7 . 請求項 1〜 5のいずれか記載のギラン 'バレー症候群発症モデル非 ヒト動物に、 被検物質を投与し、 抗 G Q 1 b抗体の出現の程度を測定 · 評価することを特徴とするギラン ·バレ一症候群及び Z又はフィッシャ —症候群治療薬のスクリーニング方法。
8 . 請求項 6又は 7記載のギラン ·バレー症候群治療薬のスクリ一ニン グ方法によって得られる治療薬。
4
PCT/JP2003/013958 2002-10-29 2003-10-29 ギラン・バレー症候群及び/又はフィッシャー症候群発症モデル非ヒト動物 WO2004039149A1 (ja)

Priority Applications (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP03770050A EP1563729A4 (en) 2002-10-29 2003-10-29 NON-MUSHROOM MODEL animal with GUILLAIN-BARRE SYNDROME AND / OR FISHER SYNDROME
US10/533,700 US7309810B2 (en) 2002-10-29 2003-10-29 Nonhuman model animal suffering from Guillain-Barré syndrome and/or fisher syndrome

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2002315091A JP2004147535A (ja) 2002-10-29 2002-10-29 ギラン・バレー症候群及び/又はフィッシャー症候群発症モデル非ヒト動物
JP2002-315091 2002-10-29

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2004039149A1 true WO2004039149A1 (ja) 2004-05-13

Family

ID=32211640

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/JP2003/013958 WO2004039149A1 (ja) 2002-10-29 2003-10-29 ギラン・バレー症候群及び/又はフィッシャー症候群発症モデル非ヒト動物

Country Status (4)

Country Link
US (1) US7309810B2 (ja)
EP (1) EP1563729A4 (ja)
JP (1) JP2004147535A (ja)
WO (1) WO2004039149A1 (ja)

Families Citing this family (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB0129260D0 (en) * 2001-12-06 2002-01-23 Eisai London Res Lab Ltd Pharmaceutical compositions and their uses
TWI489994B (zh) 2008-03-17 2015-07-01 Baxter Healthcare Sa 供免疫球蛋白及玻尿酸酶之皮下投藥之用的組合及方法
MX2012003282A (es) 2009-09-17 2012-04-30 Baxter Healthcare Sa Co-formulacion estable de hialuronidasa e inmunoglobulina, y metodos de su uso.
ES2671188T3 (es) 2009-12-21 2018-06-05 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Ratones Fc gamma R humanizados
US8883496B2 (en) 2009-12-21 2014-11-11 Regeneron Phamaceuticals, Inc. Humanized FcgR mice
JP6652931B2 (ja) 2014-04-08 2020-02-26 リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッドRegeneron Pharmaceuticals, Inc. ヒト化Fcγ受容体を有する非ヒト動物
CA3093850A1 (en) 2018-03-26 2019-10-03 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Humanized rodents for testing therapeutic agents

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP3570674B2 (ja) * 1999-12-28 2004-09-29 独立行政法人 科学技術振興機構 リウマチ関節炎好発モデル動物

Non-Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
ODAKA M. ET AL.: "N-glycoylneuraminic acid-containing GM1 is a new molecule for serum antiubody in Guillain-Barre syndrome", ANN. NEUROL., vol. 43, no. 6, 1998, pages 829 - 834, XP002979145 *
See also references of EP1563729A4 *
SUSUKI KEIICHIRO ET AL.: "Jikusakugata Guillain-Barre shokogun model dobutsu no joritsu: 2nd report", MEN'EKISEI SHINKEI SHIKKAN NI KANSURU CHOSA KENKYUHAN HEISEI 12 NENDO KENKYU HOKOKUSHO, 2001, pages 111 - 112, XP002979146 *
TAKAI T. ET AL.: "Augmented humoral and anaphylactic responses in Fc gamma RII-deficient mice", NATURE, vol. 379, no. 6563, 1996, pages 346 - 349, XP002933124 *
YUASA T. ET AL.: "Deletion of fcgamma receptor IIB renders H-2(b) mice susceptible to collagen-induced arthritis", J. EXP. MED., vol. 189, no. 1, 1999, pages 187 - 194, XP002932700 *

Also Published As

Publication number Publication date
US20070016966A1 (en) 2007-01-18
JP2004147535A (ja) 2004-05-27
EP1563729A4 (en) 2008-05-14
US7309810B2 (en) 2007-12-18
EP1563729A1 (en) 2005-08-17

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US7358416B2 (en) Transgenic mouse expressing human FcRn protein
TWI464178B (zh) 細胞凋亡抗-ige抗體
US8198508B2 (en) Reducing the risk of human anti-human antibodies through V gene manipulation
JP2008507257A (ja) V遺伝子の操作を介したヒト抗ヒト抗体の危険性の低減
JP2010521989A5 (ja)
TW201936643A (zh) 新穎之vista-ig構築體及vista-ig用於治療自體免疫、過敏及發炎病症之用途
UA125284C2 (uk) Рекомбінантне антитіло, яке специфічно зв'язується з tl1a
WO2004039149A1 (ja) ギラン・バレー症候群及び/又はフィッシャー症候群発症モデル非ヒト動物
MXPA03008454A (es) Animales transgenicos que expresan anticuerpos especificos para genes de interes y usos de los mismos.
JP3570674B2 (ja) リウマチ関節炎好発モデル動物
Lübben et al. I g E knock‐in mice suggest a role for high levels of I g E in basophil‐mediated active systemic anaphylaxis
AU2003233246B2 (en) FcyRIIa transgenic animal model for autoimmune disease
EA015897B1 (ru) Применение человеческого моноклонального антитела к ил-15 в составе композиции и лекарственного препарата (варианты), композиция и лекарственный препарат, его включающие
WO2004040969A1 (ja) Ganp導入トランスジェニック哺乳動物及びその利用
US9718891B2 (en) Antibodies specific to a novel epitope on CεMX of human membrane-bound IgE and uses thereof in treating IgE-mediated diseases
US20090258008A1 (en) Uses of the FcRn Receptor
JP3410679B2 (ja) グッドパスチャー症候群モデルマウス
JP2006067944A (ja) シナプス成熟障害モデル動物
Zhang et al. Role of Fcγ Receptor Mediated Inflammation in Immune Neuropathies
JP2002065110A (ja) Iii型アレルギー炎症モデル動物
CN116829950A (zh) 用于减少母体自身抗体的方法
JP2007075033A (ja) アトピー性皮膚炎マウス
Song Generation and characterization of FPR-rs2 (-/-) knockout mice

Legal Events

Date Code Title Description
AK Designated states

Kind code of ref document: A1

Designated state(s): US

AL Designated countries for regional patents

Kind code of ref document: A1

Designated state(s): AT BE BG CH CY CZ DE DK EE ES FI FR GB GR HU IE IT LU MC NL PT RO SE SI SK TR

121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application
WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 2003770050

Country of ref document: EP

WWP Wipo information: published in national office

Ref document number: 2003770050

Country of ref document: EP

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 2007016966

Country of ref document: US

Ref document number: 10533700

Country of ref document: US

WWP Wipo information: published in national office

Ref document number: 10533700

Country of ref document: US